vivo第6号 「umu試験」ご紹介します。
vivo 2008年3月号（第6号）2008年3月1日 業務企画部発行
Ⅰ．試験の特徴
・本試験はSOS反応を利用しているため、Ames試験で測定不能なアミノ酸を多く含む食品等でも試験が可能。
・食品中に存在する芳香族アミン（Trp-P-1、Trp-P-2、MeIQ、Glu-P-1等）に対して高感受性を示す。
・短期間（1日）で試験が終了。
インドール(青色)
Ⅱ．試験内容
１．使用菌株
NM2009株（ネズミチフス菌TA1535にumuC’-‘lacZ融合遺伝子とO-acethyltransferase遺伝子を導入した菌株）
菌株の特徴
①Ames試験菌株としての特徴を保持(膜変異(rfa変異)による透過性亢進、修復能欠損(unrB変異))
②SOS反応のためヒスチジンに影響されない(umuC’-‘lacZ融合遺伝子)
③芳香族アミン類に対し高感受性を示す(O-acethyltransferase遺伝子)
２．試験の原理
DNAへの損傷により誘発される一連のSOS遺伝子群のうち突然変異に直接関与しているumuC遺伝子の発現を、融合したlac遺伝子によるβ- galactosidase活性量として測定する
３．試験方法
使用キット：ウムラックAT（有限会社 蛋白精製工業）
陽性対照物質：AF-2（－S9）、2AA（＋S9）
試験の流れ：
菌の前培養（3hr） → 96ウェルマイクロプレートに試料溶液及び菌液（代謝活性化の場合はS9mixを混合）を分注 → インキュベーション（2hr） → 発色基質液の添加（1hr） →反応停止液添加・吸光度測定（青色発色）
判定基準：溶媒対照の吸光度の2倍以上を示した場合に陽性と判定する。
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